液相色譜是一種分析方法,制備色譜是一種分離純化手段。液相色譜把普通的色譜柱換成制備柱,就是制備液相色譜,兩者的區別在于一種以分析為目的,追求的是檢測精度,樣品承載量非常;制備色譜以分離純化為目的,它追求的是樣品承載量,制備液相效果好,檢測精度很低,檢測只用作鑒別即可。
另外,制備色譜不僅可以用液相,還可以用氣相色譜、薄層色譜、層析柱等多種載體,目前主流的制備色譜是高速逆流色譜
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液相和氣相相比的優勢有很多,主要在于應用范圍更廣。氣相只限于容易氣化的低分子量物質的分析測定,對象大部分是基礎化工原材料;而任何能溶解于某溶劑的物質都能用液相分析,適用對象是分子量從幾十到幾萬的廣大范圍。在制藥、化工、、食品等諸多重要領域,液相都已成為-的分析工具。也有兩者都能應用的交叉情況,但液相的制樣更簡單。液相色譜的出現克服了氣相色譜不能直接用于難揮發、熱不穩定及高分子化合物的弱點。
同其他色譜過程一樣,河北制備液相,hplc也是溶質在固定相和流動相之間進行的一種連續多次交換過程。它借溶質在兩相間分配系數、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質得以分離。
開始樣品加在柱頭上,假設樣品中含有3個組分,a、b和c,隨流動相一起進入色譜柱,開始在固定相和流動相之間進行分配。分配系數小的組分a不易被固定相阻留,較早地流-譜柱。分配系數大的組分c在固定相上滯留時間長,較晚流-譜柱。組分b的分配系數介于a,c之間,第二個流-譜柱。若一個含有多個組分的混合物進入系統,則混合物中各組分按其在兩相間分配系數的不同先后流-譜柱,達到分離之目的。
不同組分在色譜過程中的分離情況,首先取決于各組分在兩相間的分配系數、吸附能力、親和力等是否有差異,這是熱力學平衡問題,制備液相多少錢,也是分離的首要條件。
其次,當不同組分在色譜柱中運動時,譜帶隨柱長展寬,分離情況與兩相之間的擴散系數、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動相的流速等有關。所以分離效果則是熱力學與動力學兩方面的綜合效益。
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